維生素CELISA試劑盒進行各項實驗條件的選擇包括:
(1)固相載體的選擇:不管何種載體,在使用前均可進行篩選,用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(3)ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。
一、準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
二、靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 ng/mL。
三、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
四、重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
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