萊克多巴胺檢測(cè)試紙條(尿樣)檢測(cè)程序:
1、復(fù)溫:使用前將試劑盒置于室溫(20-25℃)平衡30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的酶標(biāo)板微孔條插入框架中,將不用的微孔條放入自封袋,保存于2-8℃,不要冷凍;
2、編號(hào):將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣品和 標(biāo)準(zhǔn)品均需做2孔平行;
3、反應(yīng):往酶標(biāo)板微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)溶液或試樣液50µl/孔, 然后加入萊克多巴胺抗體工作液50µl/孔,用蓋板膜封板,37℃反應(yīng)40min。
4、洗板:倒出孔中液體,將酶標(biāo)板倒置在吸水紙上拍打, 去除孔中液體。加入250µl/孔稀釋后洗液(將20×濃縮洗液用蒸餾水稀釋,稀釋比例:1:19),輕拍,15s后倒出孔中液體,如此重復(fù)操作共洗板5次,后用吸水紙拍干。
5、 酶標(biāo)記物:加入酶標(biāo)記物100µl/孔,用蓋板膜封板,37℃ 反應(yīng)20min。取出酶標(biāo)板,如前述洗板5次;
6、 顯色:每孔加入A、B顯色劑各50µl,輕輕振蕩混勻, 37℃避光顯色10min;
7、 測(cè)定:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo) 儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)),測(cè)定每孔吸光度值(OD值)。
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