大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

SOC Medium

2×YT肉湯 250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)

2×YT Broth

TB培養(yǎng)基 250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)豐富

Terrific Broth

SB培養(yǎng)基 250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)非常豐富

Super Broth

HB-PE自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 250用于基因工程菌大腸桿菌自誘導(dǎo)蛋白表達(dá)培養(yǎng)

HB-PET Auto Express Medium

即用型平板培養(yǎng)基

平板計(jì)數(shù)瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂，含糖，用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定

Plate Count Agar

營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用

Nutrient Agar

血平皿（9cm）10個(gè)/包用于一般細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)

Blood Agar Plates

哥倫比亞血瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包用于營(yíng)養(yǎng)要求高細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)

Columbia Blood Agar

巧克力瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養(yǎng)

Chocolate Agar

伊紅美藍(lán)瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌

Eosin-Methylene Blue Agar

SS瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包用于沙門(mén)氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

Salmonella Shigella Agar

HE瓊脂平板（9cm）10個(gè)/包用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

Hektoen Enteric Agar