注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人偏肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
英文名稱:Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
人偏肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
特女貞苷英文名: Specnuezhenide 英文別名: Nuezhenide 2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl-6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxyl)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate)-beta-D-glucopyranoside beta-D-Glucopyranoside, 2-(4-hydroxyphenyl)ethyl, 6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxy)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate), trans CAS登錄號(hào): 39011-92-2 分子式: C31H42O17 分子量: 686.62
楊梅苷中文別名: 楊梅甙; 五羥基黃酮-3-鼠李糖苷 英文名: Myricetrin 英文別名: 3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one CAS登錄號(hào): 17912-87-7 分子式: C21H20O12
原阿片堿中文別名: 雙花母草素;全能花素;原阿片堿 英文名: Protopine 英文別名: 4,6,7,14-Tetrahydro-5-methyl-bis[1,3]benzodioxolo[4,5-c-5',6'-g] azecin-13(5H)-one CAS登錄號(hào): 130-86-9 分子式: C20H19O5
原兒茶醛中文別名: 3,4-二羥基甲醛 英文名: 3,4-Dihydroxybenzaldehyde 英文別名: Protocatechuic aldehyde CAS登錄號(hào): 139-85-5 分子式: C7H6O3
地榆皂苷I中文別名: 苦丁冬青苷H; 苦丁冬青甙H 英文名: Ziyuglycoside I 英文別名: 3-O-alpha-L-Arabinopyranosylpomolic acid beta-D-glucopyranosyl ester;Kudinoside H;Zigu-glucoside I CAS登錄號(hào): 35286-58-9 分子式: C41H66O13
地榆皂苷II英文名: Ziyuglycoside II 英文別名: (3beta)-3-(alpha-L-Arabinopyranosyloxy)-19-hydroxyurs-12-en-28-oic acid;Zigu-glucoside II CAS登錄號(hào): 35286-59-0 分子式: C35H56O8 分子量: 604.81
麥角甾醇中文別名: 麥角固醇 英文名: Ergosterol 英文別名: ergosta-5,7,22-trien-3β-ol CAS登錄號(hào): 57-87-4 分子式: C28H44O
氧化槐果堿英文名: Oxysophocarpine 英文別名: Sophocarpidine; Sophocarpine N-oxide; (+)-Oxysophocarpine; (+)-Sophocarpine N-oxide; Oxysophocarpine; Sophocarpidin CAS登錄號(hào): 26904-64-3 分子式: C15H24N2O2 分子量: 364.36
豆甾醇中文別名: 豆固醇 英文名: Stigmasterol 英文別名: Stigmasta-5,22-dien-3beta-ol; 94%; stigmasta-5,22-dien-3-beta-ol; 24-Ethylcholesta-5,22-dien-3beta-ol CAS登錄號(hào): 83-48-7 分子式: C29H48O
7-羥基香豆素中文別名: 傘形花內(nèi)酯; 傘形酮 英文名: Umbelliferone 英文別名: 7-Hydroxycoumarin CAS登錄號(hào): 93-35-6 分子式: C9H6O3
漢黃芩素中文別名: 5,7-二羥基-8-甲氧基-2-苯基-4H-1-苯并呋喃-4-酮 英文名: Wogonin 英文別名: 5,7-Dihydroxy-8-methoxy-2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one CAS登錄號(hào): 632-85-9 分子式: C16H12O5
人偏肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢BOC-L-脯氨醇,5g6-CARBOXYFLUORESCEIN N-SUCCINIMIDYL ESTER 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
L-別蘇氨酸,1g4,4'-DIMETHOXYBENZHYDROL 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
L-別蘇氨酸,250mg4-(Trifluoromethyl)benzylamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肌氨酸乙酯鹽酸鹽,100gtert-Butoxytrimethylsilane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肌氨酸乙酯鹽酸鹽,25g3-Amino-5-methylpyrazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肌氨酸乙酯鹽酸鹽,500gBOC-Glycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肌氨酸乙酯鹽酸鹽,5gVitamin E 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
肌氨酸甲酯鹽酸鹽,100gLEAD TELLURIDE 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
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