注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Lactococcus lactis PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
短葶山麥冬皂苷C英文名: Liriope muscari baily saponins C CAS登錄號: 87480-46-4 分子式: C44H70O17 分子量: 871.0 分子結(jié)構(gòu):
冬凌草甲素英文名: Oridonin CAS登錄號: 28957-04-2 分子式: C20H28O6 分子量: 364.43 分子結(jié)構(gòu):
丹酚酸A中文別名: 丹參酚酸A 英文名: Salvianolic acid A 英文別名: Dan phenolic acid A; Salvianolic acid CAS登錄號: 96574-01-5 分子式: C26H22O10
丹參素鈉英文名: Sodium Danshensu 英文別名: 3,4-Dihydroxyphenyl-.alpha.-hydroxypropanoic acid sodium salt CAS登錄號: 67920-52-9 分子式: C9H10O5•Na 分子量: 221.04
丁香酚英文名: Eugenol 英文別名: Allylguaiacol; Bioxeda; Caryophyllic acid; Dentogum; Eugenic acid CAS登錄號: 97-53-0 分子式: C10H12O 分子量: 164.20
丹酚酸B中文別名: 丹參酚酸B 英文名: Salvianolic acid B 英文別名: Dan Shen Suan B; Danfensuan B; Lithospermic acid B CAS登錄號: 115939-25-8 分子式: C36H30O16
大豆苷中文別名: 大豆甙 英文名: Daidzin 英文別名: Daidzein 7-glucoside; Daidzoside CAS登錄號: 552-66-9 分子式: C21H20O9
蟲草素英文名: Cordycepin 英文別名: 9-(3-Deoxy-β-D-ribofuranosyl)adenine; 9-Cordyceposidoadenine CAS登錄號: 73-03-0 分子式: C10H13N5O3 分子量: 251.24
橙皮苷中文別名: 橙皮甙 英文名: Hesperidin 英文別名: Atripliside B; Cirantin; Hesperidoside CAS登錄號: 520-26-3 分子式: C28H34O15
大黃酸英文名: Rhein 英文別名: Rheic acid; Rheinic acid; Rhubarb yellow CAS登錄號: 478-43-3 分子式: C15H8O6 分子量: 284.22
百兩金素中文別名: 百兩金皂苷A 英文名: Ardisiacrispin A 英文別名: Deglucocyclamin;Saxifragifolin B CAS登錄號: 23643-61-0 分子式: C52H84O22
乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢N-芐基甘氨酸乙酯,500gMAGNESIUM MONOPEROXYPHTHALATE HEXAHYDRATE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,100gPropylthiouracil 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,25gBOC-BETA-IODO-ALA-OME 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,5gMagnesium fluosilicate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
氨基酸螯合鐵,100gN,N-Dimethylcapramide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
氨基酸螯合鐵,25gSILICA 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DL-高半胱氨酸,1gIsopropyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DL-高半胱氨酸,5g(S)-(-)-2,2'-Bis(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthyl 質(zhì)量規(guī)格:大于98%,化學(xué)純
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