產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱(chēng) | Leptospira spp.PCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
運(yùn)輸及保存:
鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
CBZ-L-苯丙氨酸/N-羰芐氧基-L-苯丙氨酸/N-芐氧羰?;?L-苯丙氨酸/CBZ-L-Phe特純,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1161-13-3RT
CBZ-D-苯丙氨酸/N-芐氧羰基-D-苯丙氨酸/N-芐氧羰基-D-苯基丙氨酸/Z-D-Phe-OH特純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2448-45-5保存:-20℃
CBZ-L-谷氨酸/N-BOC-L-谷氨酸/苯甲氧羰基-L-谷氨酸/N-芐氧羰基-L-谷氨酸/Z-Glu-OHBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1155-62-0RT
CBZ-D-谷氨酸/N-芐氧羰基-D-谷氨酸/N-芐氧羰基-D-氨基戊二酸/CBZ-D-Glu特純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63648-73-7RT
CBZ-L-天冬氨酸/N-芐氧羰基-L-天冬氨酸/苯甲氧羰基-L-天門(mén)冬氨酸/CBZ-L-天門(mén)冬氨酸/Z-L-aspartic acid特純,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1152-61-0RT
CBZ-D-天冬氨酸/N-芐氧羰基-D-天冬氨酸/N-CBZ-D-天門(mén)冬氨酸/N-芐氧羰基-D-天門(mén)冬氨酸/N-Cbz-D-aspartic Acid特純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,78663-07-7RT
CBZ-L-精氨酸/N-芐氧羰基-L-精氨酸/CBZ-L-ArgBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1234-35-1RT
CBZ-DL-苯丙氨酸/N-芐氧羰基-DL-苯基丙氨酸/N-芐氧羰基-DL-苯丙氨酸/Z-DL-phenylalanine特純,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3588-57-6RT
CBZ-硫苯基-L-半胱氨酸/N-芐氧羰基-S-苯基-L-半胱氨酸/CBZ-S-苯基-L-半胱氨酸/N-Z-S-phenyl-L-cysteineBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,159453-24-4RT
CBZ-甘氨酸/芐氧羰基甘氨酸/N-羧甲基氨基甲酸芐酯/N-芐氧羰基-甘氨酸/CBZ-L-Gly特純,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1138-80-3RT
CBZ-L-羥脯氨酸/N-芐氧羰基-L-羥脯氨酸/N-Cbz-Hydroxy-L-proline特純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13504-85-3RT
CBZ-L-脯氨酸/N-芐氧羰基-L-脯氨酸/N-羰芐氧基-L-嘌呤/N-CBZ-L-Proline特純,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1148-11-4RT
CBZ-D-脯氨酸/N-芐氧羰基-D-脯氨酸/Z-D-Pro-OH特純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6404-31-5RT
CBZ-L-異亮氨酸/N-芐氧羰基-L-異亮氨酸/N-羰酰芐氧基-L-異亮氨酸/Z-L-IsoleucineBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3160-59-6RT
鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)豬血清,500ml1-AMINOTRIDECANE 質(zhì)量規(guī)格:>99,ALFA原裝
雞血清,100mlLitsea cubeba oil 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR
雞血清,500mlTrimethoprim 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
狗血清,100mlo-Cresolphthalein Complexone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
狗血清,500mlMethyl trioctyl ammonium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
猴血清,100ml1,1-Cyclohexanediacetic acid mono amide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
猴血清,50ml4-Chloro-5-iodopyrimidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
羊血漿,100ml1-Hydroxybenzotriazole hydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
技術(shù)特點(diǎn):
1產(chǎn)品僅用于科研準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
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