技術(shù)特點:
1梅恩君病毒PCR檢測試劑盒哪家代理準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 梅恩君病毒PCR檢測試劑盒哪家代理 |
英文名稱 | Main Drain Virus(MDV)RTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
4種分開/套,100mM/種0.1ml*4支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
2′-脫氧腺苷/2′-脫氧腺甙/去氧胰苷/去氧腺嘌呤配糖/去氧腺核苷/脫氧腺嘌呤核苷/9-β-D-2ˊ-脫氧呋喃核苷腺嘌呤/2′-Da超純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16373-93-6RT
A250/A260=0.76~0.82
A250/A260=0.80±0.03
2′-脫氧胞苷/2′-脫氧胞嘧啶核苷/2'-脫氧胞嘧啶核苷/2'-脫氧胞嘧啶核甙一水合物/2'-脫氧胞苷一水合物/2′-dC高純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,951-77-9RT
2′-脫氧胞苷鹽酸/2′-脫氧胞嘧啶核苷鹽酸/鹽酸-2ˊ-脫氧胞苷/鹽酸胞核嘧啶脫氧核糖核苷/2′-dC•HC1超純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3992-42-5RT
A250/A260=0.46±0.03
2′-脫氧鳥苷/2′-脫氧鳥甙/2′-鳥嘌呤脫氧核苷/9-β-2ˊ-呋喃脫氧核苷鳥嘌呤/鳥嘌呤脫氧核糖核苷/去氧鳥便嘌呤核苷/2'-去氧鳥甙/2′-Dg超純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,961-07-9RT
250/A260=1.12~1.18
A250/A260=1.12~1.18
A250/A260=1.15±0.03
2′-脫氧胸苷/β-胸苷/β-脫氧胸腺核苷/胸苷/胸腺嘧啶核苷/胸腺核苷/2′-脫氧胸腺嘧啶核苷/去氧胸腺苷/胸腺脫氧核苷/胸腺啶/胸腺嘧啶脫氧核苷/2-dT超純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,50-89-5RT,避光
A250/A260=0.62~0.68
A250/A260=0.65±0.03
梅恩君病毒PCR檢測試劑盒哪家代理Piroxicam 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
ALPHA-HYDROXY-GAMMA-BUTYROLACTONE 質(zhì)量規(guī)格:≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-(TRIMETHYLSILYL)ETHOXYMETHYLTRIPHENYLPHOSPHONIUM CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>99%
NAPHTHENIC ACID SODIUM SALT 質(zhì)量規(guī)格:>99%
Tiglic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,*
5-Methyl-2-phenyl-1,2-dihydropyrazol-3-one 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Quinic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進口原裝
BENZOYL BROMIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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