參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒
英文名稱:Mannheimia granulomatisPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
縮節(jié)胺/助壯素/N,N-二甲基哌啶氯化物/甲哌啶/調節(jié)啶/壯棉素/皮克斯/1,1-二甲基氮雜環(huán)己基氯化物/Mepiquat chloride高純,96%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,24307-26-4RT
噻苯隆/脫葉靈/脫葉脲/脫落寶/N-苯基-N-1,2,3-噻二唑-5-脲/賽苯隆/1-苯基-3-(1,2,3-噻二唑-5-基)脲/TDZ高純,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,51707-55-22~8℃
生根粉/Rooting Powde優(yōu)質級100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
花寶1號/ N-P-K(7-6-19)優(yōu)質級100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
花寶2號/N-P-K優(yōu)質級100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
花寶3號/N-P-K優(yōu)質級100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
花寶5號/N-P-K優(yōu)質級50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
茶多酚/茶精/綠茶提取物/PPT高純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84650-60-2RT,避光
兒茶素/(+)-兒茶素/兒茶酚/兒茶酸/(+)-兒茶精/(+)-兒茶酸/反式-3,3ˊ,4ˊ,4,7-五羥基黃烷/(+)-Catechin hydrateBR,90%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,225937-10-02~8℃,避光
乙酸-α-萘酯/乙酸-1-萘酯/醋酸-1-萘酯/1-乙酸萘基酯/α-乙酸萘酯/1-萘基乙酸酯/α-Napthyl acetateCP,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,830-81-92~8℃,避光
乙酸-β-萘酯/乙酸-2-萘酯/醋酸-β-萘酯/乙酸2-萘基酯/β-乙酸萘酯/2-萘基乙酯/醋酸-2-萘酯/β-萘基乙酸酯/β-Napthyl acetateCP25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1523-11-1RT,避光
3-氯殺/開樂散/Dicofol分析標準品100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,115-32-22~8℃,避光
3-氨基-1,2,4-三唑/3-氨基-1,2,4-三氮茂/3-氨基-1H-1,2,4-三唑/3-氨基-1H-1,2,4-三氮唑/3-氨基-1,2,4-三氮唑/氨基三唑/1,2,4-三唑基-3-胺/殺草強/3-氨基-1,2,4-三氮雜茂/3-ATBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61-82-5RT
阿特拉津/莠去津/蓋薩林/2-氯-4-乙氨基-6-異丙氨基-1,3,5-三嗪/6-氯-N-乙基-N'-(1-甲基乙基)-1,3,5-三嗪-2,3-二胺/2-氯-4-乙基胺-6-異丙胺-s-三嗪/6-氯-N2-乙基-N4-異丙基-1,3,5-三嗪-2,4 -二胺/AtrazineBR,97%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1912-24-9RT
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒Caesium fluoride 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
OLEOYL CHLORIDE 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
NA 質量規(guī)格:TLC≥98%,標準品
Sodium periodate 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Fmoc-Trp(Boc)-OH 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
3-Hydroxycinnamic acid 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
5,6,7,8-TETRAHYDROISOQUINOLINE 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
(E)-4-[2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethenyl]-Phenol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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