注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:中東呼吸綜合征科研PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Middle East Respiratory SyndromeCoronavirus(MERSCoV)RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
中東呼吸綜合征科研PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
聚乙二醇3350/聚氧乙烯3350;聚氧化乙烯3350/PEG3350
聚乙烯醇/PVA1750±50類型500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9002-89-5RT
聚乙烯醇縮丁醛/聚乙烯醇縮丁醛樹脂/聚酸甲基酯/PVB航空級500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63148-65-2RT
1,3-丙二醇/1,3--二羥基丙烷/1,3-PropanediolAR,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,504-63-2RT
1,3-丁二醇/1,3-二羥基丁烷/(±)-1,3-丁二醇/間丁二醇/丁間二醇/1,3-ButanediolAR,99%250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,107-88-0RT
1,4-丁二醇/1,4-二羥基丁烷/丁撐二醇/丁隔二醇/1,4-二羥丁烷/1.4-二羰基丁烷/伸丁二醇/BDOCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,110-63-4RT
2,3-丁二醇/丁二醇/2,3-二羥基丁烷/丁二仲醇/2,3-二羰基丁烷/2,3-丁烯乙二醇/2,3-ButanediolAR,98%250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,513-85-9RT
1,2,4-丁三醇/1,2,4-三羥基丁烷/丁三醇/BTAR,96%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3068-00-6RT
一縮二乙二醇/二甘醇/二乙二醇/雙甘醇/2,2'-氧代二乙醇/Diethylene glycolCP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-46-6RT
新戊二醇/季戊二醇/2,2-二甲基-1,3-丙二醇/二甲基三亞甲基二醇/二甲基丙二醇/NPGCP,96%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,126-30-7RT
一縮二丙二醇/雙丙甘醇/二丙二醇/二聚丙二醇/二羥基代二丙醚/丙二醇-(1,2)-醚/縮水二丙二醇/二(2-羥丙基)醚/丙醇醚/氧化二丙醇/雙丙二醇/二羥式代二丙醚雙(2-羥丙基)醚/1,1'-氧二-2-丙醇/β, β-二羥二正丙醚/DPGCP100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25265-71-8RT
1,6-己二醇/六亞甲基二醇/六亞甲基甘醇/1,6-乙烯乙二醇/六次甲基甘醇/1,6-HexanediolAR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,629-11-8RT
1,2,6-己三醇/1,2,6-三羥基乙烷/1,2,6-HexanetriolAR,96%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-69-4RT
聚丙二醇2000/丙二醇聚醚2000/聚丙二醇2000/PPGCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25322-69-4RT
中東呼吸綜合征科研PCR檢測試劑盒價格Europium(III) acetate hydrate 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PULCHINENOSIDE B4 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
ALPHA-METHYL-L-VALINE HYDROCHLORIDE 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Cimetidine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Kinetin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ferrocenemethanol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Timosaponin BII 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Diethyl (2-oxopropyl)phosphonate 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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