運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 亞洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱 | Mycobacterium asiaticumPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1亞洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
1,4-二羥基蒽醌/1,4-二羥基-9,10-蒽二酮/醌茜/奎札因/1,4-蒽醌二酚/透明橙G/溶劑橙86 1,4-DihydroxyanthraquinoneBR,96%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,81-64-1RT
1,8-二羥基蒽醌/1,8-二羥基-9,10-蒽二酮/1,8-二羥基喹酮/丹蒽醌/1,8-蒽醌二酚/以斯替凈/1,8-二羥蒽醌/1,8-DihydroxyanthraquinoneBR,95%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,117-10-2RT
芐脒鹽酸鹽/鹽酸芐脒/苯甲脒鹽酸鹽/芐脒氫氯化物/Benzamidine hydrochlorideBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1670-14-0RT
硫酸鋁鉀/明釩/鉀明釩/十二水硫酸鋁鉀/白礬/纖鉀明礬/硫酸鋁(III)鉀/Aluminum potassium sulfate dodecahydrateAR,99.8%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7784-24-9RT
磷酸氫二鉀/二鹽基磷酸鉀/雙鹽基磷酸鉀/磷酸二鉀/DKPAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16788-57-1RT
無(wú)水磷酸氫二鉀/無(wú)水磷酸二鉀/Potassium phosphate dibasicAR,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2139900RT
乙基黃原酸鉀/乙基二硫代碳酸鉀/黃酸鉀/乙原磺酸鉀/O-乙基二硫代碳酸酯鉀鹽/乙基二硫化碳酸鉀/O-乙基二硫代碳酸鉀/農(nóng)藥乳化劑600/乙黃原酸鉀/Potassium ethyl xanthateAR,95%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,140-89-6RT
鄰苯二甲酸氫鉀/苯二甲酸氫鉀/酞酸氫鉀/1,2-苯二甲酸氫鉀/1,2-苯二甲酸單鉀鹽/Potassium hydrogen phthalateGR,99.8%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,877-24-7RT
溴化鉀/鉀溴/灰鉀/Potassium bromideAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:7758-02-3RT
無(wú)水碳酸鉀/碳酸鉀/鉀堿/珍珠灰/粗碳酸鉀/草堿/桐堿/珠灰/Potassium carbonateAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,584-08-7RT
結(jié)晶碳酸鉀/碳酸鉀一點(diǎn)五水合物/Potassium carbonate sesquihydrateACS,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6381-79-9RT
碘化鉀/灰碘/Potassium iodideAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7681-11-0RT,避光
焦硫酸鉀/無(wú)水重硫酸鉀/無(wú)水酸性硫酸鉀/Potassium pyrosulfateAR,98%500克國(guó)產(chǎn)7790-62-7RT
酒石酸鉀/酒石酸二鉀半水合物/ L-酒石酸鉀半水合物/Potassium tartrate hemihydrateAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6100-19-2RT
亞洲分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)Celliton Fast Pink B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2,2-Diethoxy-N,N-dimethylethylamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-Chloropyridine-2-carboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Boc-L-Tyrosine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Diisopropanolamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LOCUST BEAN GUM 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-(TRIFLUOROMETHYL)PIPERIDINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1,3-BIS(2,4,6-TRIMETHYLPHENYL)IMIDAZOLIUM CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96.50%,標(biāo)準(zhǔn)品
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