參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Mycobacterium spp.PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
S-乙酰巰基丁二酸酐/硫代乙酰琥珀酸酐/硫代乙酸-S-(四氫-2,5-二氧代-3-)酯/S-乙酰巰基琥珀酸酐/S-乙酰基巰基琥珀酸酐/SAMSABR,95%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6953-60-2RT
十二烯基丁二酸酐/環(huán)氧包埋劑/DDSA硬化劑/3-(十二烯基)二氫-2,5-喃二酮/十二烯基琥珀酸酐/Dodecenylsuccinic anhydrideBR,90%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25377-73-5RT
順式六氫苯二甲酸酐/順式六氫苯酐/順-1,2-環(huán)己烷二羧酸酐/六氫化鄰苯二甲酸酐/六氫化酞酸酐/環(huán)己烷-1,2-二羧酸酐/六氫-1,3-異苯并呋喃二酮/六氫苯酐/六氫鄰苯二甲酸酐/環(huán)己烷二羧酐/HHPABR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13149-00-3RT
內(nèi)次甲基四氫苯二甲酸酐/NA酸酐/降冰片烯二酸酐/(3aa,4a,7a,7aa)-3a,4,7,7a-四氫-4,7-亞甲基異苯并呋喃-1,3-二酮/3,6-內(nèi)亞甲基-1,2,3,6-四氫化鄰苯二甲酸酐/碳化酯/3,6-內(nèi)次甲基-1,2,3,6-四氫苯二甲酸酐/5-壬烯-2,3-二碳氧酸酐/5-降冰片烯-2,3-二甲酸酐/Nadic anhydrideCP,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,129-64-6RT
丁二酸酐/琥珀酸酐/琥珀酐/2,5-四氫呋二酮/二氫-2,5-呋喃二酮/四氫-2,5-二氧呋喃/四氫-2,5-二酮/SAACP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,108-30-5RT
2-甲基苯并噻唑/甲基苯并噻吡啶/2-甲苯并噻唑/2-MethylbenzothiazoleBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,120-75-2RT
6-硝基苯并咪唑/硝基間二氮雜茚/6-硝基苯并二氮唑/5-硝基-1H-苯并咪唑/5-NitrobenzimidazoleBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,94-52-0RT
鈹試劑Ⅰ/(對硝基苯偶氮)甲苯二酚/2,4-二羥基-6-甲基-4′-硝基偶氮苯/4-[(對硝基苯)偶氮]-5-甲基間苯二酚/4-(對硝基苯偶氮)苔黑酚/4-(對硝基苯偶氮)苔黑素/Beryllon IBR5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,607-96-5RT
鈹試劑II/8-羥基萘-3,6-二磺酸(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羥基萘-3′,6′-二磺酸四鈉鹽/H酸偶氮變色酸鈉/2-(8-羥基萘-3,6-二磺酸鈉偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸鈉/Beryllon IIAR10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,51550-25-5RT
石墨粉/黑鉛/筆鉛/半石墨/不純石墨/墨鉛/炭精/石墨潤滑劑/膠體石墨/導(dǎo)電敷層/Graphite powderCP,99.85%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7782-42-5RT
人造沸石/交替砂/軟水砂/變通質(zhì)/沸石/PermutitCP,20-40目250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1318-02-1RT
海砂/石英玻璃/Sea sandCP,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,60676-86-0RT
羅丹寧/銀試劑/羅丹酸/2-硫代-4-噻唑烷酮/繞丹寧/2-硫代-2,4-噻唑烷二酮/2-硫-4-氧四氫噻唑/RhodanineCP25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,141-84-4RT
N-甲基吩嗪甲基硫酸鹽/N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸鹽/吩嗪二甲酯硫酸鹽/5-甲基吩嗪硫酸甲酯/吩嗪硫酸甲酯/甲硫吩嗪/硫酸甲酯吩嗪/PMS高純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,299-11-6避光,-20℃
分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒價格Boc-N-Methyl-L-phenylglycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-METHYL-1-PENTANOL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Pent* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-FLUORO-3-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
N-Aminorhodanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Boc-beta-alanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Aminobenzenethiol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PHENYLTHIOTRIMETHYLSILANE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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