技術(shù)特點(diǎn):
1發(fā)酵支原體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 發(fā)酵支原體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理 |
英文名稱 | Mycoplasma fermentansPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
雞蛋清白蛋白 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,BR,80%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 雞蛋清白蛋白 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,其他名稱: 卵清白蛋白;卵白蛋白;卵清蛋白 英文名稱: OVA 其他名稱: Albumin(egg white); Ovalbumin 產(chǎn)品規(guī)格: 金標(biāo)級(jí),99%
人血清白蛋白(組份五) 中文名稱: 人血清白蛋白(組份五) 其他名稱: 人血白蛋白;血清白蛋白;白蛋白 英文名稱: HSA 其他名稱: Albumin from human serum 產(chǎn)品規(guī)格: BR,96-99% 包裝: 500毫克/1克/5克
卵白素(雞蛋) 其他名稱: 親和素;抗生物素蛋白;親合素 英文名稱: Avidin(chiken egg white) 產(chǎn)品規(guī)格: BR,95% 包裝: 5毫克/25毫克 CAS號(hào):1405-69-2分子量:glycoprotein mol wt 66 kDa;subunit mol wt 16 kDa
鏈親和素 其他名稱: 鏈酶親和素;鏈霉抗生物素蛋白;鏈親合素 英文名稱: Streptavidin from Streptomyces avidinii 產(chǎn)品規(guī)格: 生物技術(shù)級(jí),17u/mg 包裝: 1毫克/5毫克CAS號(hào):9013-20-1 分子量:60kD
牛血紅蛋白 中文名稱: 牛血紅蛋白 其他名稱: 血紅蛋白(牛血);血紅朊;血球素;血球質(zhì);血色蛋白;血色素 英文名稱: Hb 其他名稱: Hemoglobin from bovine blood 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝: 1克/10克/100克
纖維蛋白(人血) 英文名稱: Fibrin from human plasma 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝: 1克 CAS號(hào):9001-31-4 分子量:~68000級(jí)別:BR
人血纖維蛋白原 中文名稱: 人血纖維蛋白原 其他名稱: 血漿凝固因子 英文名稱: Fibrinogen from human plasma 產(chǎn)品規(guī)格: BR,50-70% 包裝: 100毫克/250毫克/1克CAS號(hào):9001-32-5
牛血纖維蛋白原 中文名稱: 牛血纖維蛋白原 其他名稱: 血漿凝固因子 英文名稱: Fibrinogen from bovine plasma 產(chǎn)品規(guī)格: BR,98% 包裝: 100毫克/1克/5克CAS號(hào):9001-32-5
發(fā)酵支原體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理POLY(ACRYLIC ACID) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Benzidine dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
6-Chloro-2-methyl-3-nitropyridine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-ANDROSTEN-11BETA-OL-3,17-DIONE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
BOC-D-ARG(TOS)-OH ETOAC 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Acetone oxime 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1,3-Dioxolane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
Pyrantel pamoate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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