產(chǎn)品及特點:
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱 | 致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣 |
英文名稱 | Pathogenic E.coliPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
硫鈰銨英文名稱: Ammonium ceric sulfate其他名稱: Ceric ammonium sulfate產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包裝:25克CAS號:18923-36-9CeH16N4O16S4·4H2O=668.58
羥溶液其他名稱: 羥50%水溶液;羥;胲英文名稱: Hydroxylamine solution產(chǎn)品規(guī)格: BR,50%包裝:25毫升/100毫升/500毫升CAS號:7803-49-8H3NO=33.03
硫鎂其他名稱: 結(jié)晶硫鎂;苦鹽;硫苦;瀉利鹽;七水硫鎂;鐵精礦英文名稱: Magnesium sulfate heptahydrate其他名稱: Epsom salt;Bitter salt e產(chǎn)品規(guī)格: 4N包裝:25克產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
無水硫鎂英文名稱: Magnesium sulfate其他名稱: Epsom salt產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包裝:500克CAS號:7487-88-9MgSO4=120.37
氧化鎂基準試劑,99.9%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 氧化鎂其他名稱: 苦土;燈粉;鍛燒水鎂石;鍛燒鎂氧;鎂氧;輕燒氧化鎂;輕質(zhì)氧化鎂英文名稱: Magnesium oxide其他名稱: Magnesia usta;Calcined magnesia;Magcal;Maglit產(chǎn)品規(guī)格: 基準試劑,99.9%
鎂其他名稱: 偏鎂英文名稱: Magnesium borate monohydrate其他名稱: Magnesiummetaborate產(chǎn)品規(guī)格: 納米級,晶須,99.5%包裝:25克產(chǎn)品規(guī)格: CP,98.5%
化鎂英文名稱: Magnesium fluoride其他名稱: Afluon;Sellaite產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:500克CAS號:7783-40-6MgF2=62.30
氫氧化鎂英文名稱: Magnesum hydroxide其他名稱: Milk of magnesia;Marinco H產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:100克CAS號:1309-42-8Mg(OH)2=58.32
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣Ethyl benzoylacetate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
FORMAMIDINE HYDROCHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Vinylmagnesium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
2,4-DINITROBENZENESULFONIC ACID SODIUM SALT 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
3-Aminobenzonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
2-Chloro-L-phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
2-Bromo-4-fluoroaniline 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
TETRABUTYLPHOSPHONIUM HYDROXIDE 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
技術特點:
1產(chǎn)品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結(jié)果與金標準測序法比對,結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
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