運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Redspotted Grouper Nervous Necrosis Virus(RGNNV)RTPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
L-乳鎂其他名稱: 乳鎂;L-乳鎂氫氧化物英文名稱: Magnesium L-lactate hydrate其他名稱: L-Lactic acid magnesium salt產(chǎn)品規(guī)格: BR,97.5%包裝:100克/500克CAS號(hào):18917-93-6
L-乳鉀其他名稱: 乳鉀英文名稱: Potassium L-lactate其他名稱: L-Lactic acid potassium salt產(chǎn)品規(guī)格: AR,60%包裝:250毫升/1升CAS號(hào):85895-78-9
檸檬鋅英文名稱: Zinc citrate其他名稱: Zinc chromate(VI)產(chǎn)品規(guī)格: CP,98.5%包裝:500克CAS號(hào):546-46-3C12H10O14Zn3=574.37
葡萄糖亞鐵其他名稱: 葡萄糖鐵(II)二水合物;葡萄糖亞鐵鹽英文名稱: Iron(II) D-gluconate dihydrate其他名稱: D-Gluconic acid iron(II) salt dihydrate;Gluconic Acid Iron(II) Salt;Iron(II) Gluconate產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:100克/1公斤CAS號(hào):22830-45-1
葡萄糖鎂英文名稱: Magnesium gluconate其他名稱: Magnesium D-gluconate;D-Gluconic acid magnesium salt產(chǎn)品規(guī)格: USP級(jí),98%包裝:100克/500克CAS號(hào):3632-91-5C12H22MgO14=414.60
葡萄糖銅中文名稱: 葡萄糖銅其他名稱: 雙(D-葡糖)銅;葡萄糖銅(II)英文名稱: Copper gluconate其他名稱: Copper(II) gluconate;D-Gluconic acid copper(II) salt產(chǎn)品規(guī)格: USP級(jí),98%包裝:25克/100克/500克
葡萄糖鉀英文名稱: Potassium gluconate其他名稱: D-Gluconic acid monopotassium salt;Gluconic acid potassium salt產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包裝:100克/500克CAS號(hào):299-27-4C6H11KO7=234.24
脫氫乙中文名稱: 脫氫乙其他名稱: 脫氫醋;6-甲基-3-乙酰-2-哌哢;6-甲基-3-乙酰-α,γ-吡喃;3-乙?;?6-甲基-2H-吡喃-2,4(3H)二英文名稱: DHA其他名稱: Dehydroacetic acid;3-Acetyl-4-hydroxy-6-methyl-2H-pyran-2-one;2-Acetyl-5-hydroxy-3-oxo-4-hexenoic acid delta-lactone產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:25克/100克/500克
赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測(cè)試劑盒Anti-AD7c-NTP 神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AD7C-NTP(human) 神經(jīng)絲蛋白(人) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADAMTS1 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-ADAMTS7 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADAMTS7(NT) 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 (N端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-DRADA (N terminal) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶(N端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-DRADA (C terminal) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶(C端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Adducin protein 內(nèi)收蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADK/AK 腺苷酸激酶 規(guī)格: 0.2ml *
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