一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標志物。二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。
二抗在標記和檢測方面比較靈敏和靈活。所以,它們在流式細胞術、蛋白質印跡和細胞成像等一系列應用中用于一抗的比色、化學發(fā)光和熒光檢測。二抗類型的選擇基于一抗的類別:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標簽類型和來源宿主。
由于大多數一抗是使用少數宿主物種開發(fā)的,并且大多數一抗屬于 IgG 類,因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應始終能夠識別產生一抗的宿主物種,例如,為了檢測從小鼠產生的一抗,使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白質印跡中,標記通常是化學發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細胞術和免疫熒光中,僅使用熒光標記。
產品名稱 | PE-CY5標記的兔抗馬IgM | 英文名稱 | Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5 |
規(guī) 格 | 0.2ml/200μg | 貨號 | EY-0709K |
濃 度 | 1mg/1ml | 抗體來源 | Rabbit |
亞 型 | IgG | 產品類型 | 標記二抗 |
免 疫 原 Full length plasma protein
純化方法 affinitypurified by Protein A
產品應用 IF=1:100-1000
not yet tested inother applications.
optimaldilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year.
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一、 免疫動物選擇
根據需要產生目標抗原的免疫反應,選擇合適的免疫動物。例如,小鼠是免疫動物之一,因其易于操作且在免疫應答方面較為強大。
二、抗原免疫
將目標抗原注射到免疫動物體內,通常需要多次免疫以激發(fā)免疫反應??梢赃x擇不同的免疫路線,如皮下、腹腔、靜脈等。
三 、細胞融合
從免疫動物獲得脾細胞或淋巴細胞,與骨髓瘤細胞或其他癌細胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成雜交瘤細胞。融合細胞通常使用(PEG)或電穿孔等方法促進細胞融合。
四、 雜交瘤細胞篩選
對融合細胞進行篩選,一般使用HAT選擇性培養(yǎng)基,通過對非雜交瘤細胞和單克隆雜交瘤細胞的抗代選擇,篩選出產生目標抗體的單克隆雜交瘤細胞。
五、 單克隆抗體生產
從篩選出的單克隆雜交瘤細胞中獲取單一細胞系,并進行大規(guī)模培養(yǎng)和產生抗體。一般可采用體外或體內方式
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