型 號
產(chǎn)品時間2024-02-17
所屬分類大鼠細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時,即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) | 年齡性別 | 雄性 |
種屬 | 大鼠 | 組織來源 | 腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤 |
細(xì)胞形態(tài) | 成團(tuán)狀懸浮、半貼壁;小的形狀不規(guī)則細(xì)胞 | 生長特性 | 貼壁/懸浮 |
細(xì)胞代數(shù); | 10代以內(nèi) | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 PC12未分化;大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化 重要提醒;注意:PC12細(xì)胞呈漂浮成簇狀生長,伴有少量松散貼壁的細(xì)胞,換液、傳代時需小心保留漂浮生長的細(xì)胞 細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi) 背景介紹;PC-12(未分化)細(xì)胞是來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。PC-12(未分化)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子(NGF)受體,NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。PC-12(未分化)細(xì)胞不合成腎上腺素。 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 保藏機構(gòu);中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心 培養(yǎng)基;1640+5%FBS+10%馬血清+P/S 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時,即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實驗完成。
(4)消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后,應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mouse macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
大鼠白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
Mouseosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit 小鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanNephrinELISAKit人蛋白規(guī)格:48T/96T
銅藍(lán)蛋白活性比色法定量檢測試劑盒20次
人酶ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠L苯解氨酶(PAL)免疫試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
胃泌素(Gasin)ELISA試劑盒 ,英文名: Gasin ELISA Kit
MouseNeuroophin4,-4ELISA試劑盒小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitNA兔去甲規(guī)格:48T/96T
Humanmannosereceptor,MRELISAKit人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: ACEⅠ ELISA Kit
人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA檢測試劑盒Humaotavirusaigen,RVAgELISAKit 96T/48T
大鼠CD68分子(CD68)免疫試劑盒 Rat Cluster of Differeiation 68, CD68 ELISA kit
CLIAKitforsEPCR(HumansolubleendothelialproteinCreceptor)ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體規(guī)格:48T/96T
周期素依賴性激酶4抗體
含普列克底物蛋白家族H成員1抗體
三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體
NEDD4結(jié)合蛋白2樣蛋白1抗體
線粒體載體同源物1抗體
胞漿磷蛋白PACSIN2單克隆抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
CYP1A2單克隆抗體
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)液泡蛋白分選蛋白29抗體
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