型 號
產(chǎn)品時間2024-02-18
所屬分類其它細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細(xì)胞凍存。
豬肝星狀細(xì)胞（永生化）
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 豬肝星狀細(xì)胞（永生化） | 組織來源 | 實驗動物正常肝組織 |
種屬 | 豬 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 長梭狀不規(guī)則細(xì)胞 |
| 溫度： | 37℃ | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹：
背景簡介;肝星狀細(xì)胞是細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源，正常情況下肝星狀細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)。當(dāng)肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時，肝星狀細(xì)胞被激活，其表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?，肝星狀?xì)胞激活并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞，各種致纖維化因素均把HSC作為終靶細(xì)胞。激活的肝星狀細(xì)胞一方面通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成和肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建，另一方面通過細(xì)胞收縮使肝竇內(nèi)壓升高。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性 培養(yǎng)基;豬肝星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件;氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴(yán)格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。
（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進度。
（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織樣品組織S（CATHEPSIN S）活性熒光定量檢測試劑盒
載玻片細(xì)胞組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒
pGEX＋目的基因
石蠟切片組織CYTOCHROME C蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
組織O鏈接硫酸酯化糖胺多糖（O-sGAG）含量阿爾新藍(lán)（alcian blue）比色法定量檢測試劑盒
胞漿超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD）分離試劑盒
總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
C1-ESTERASE
細(xì)胞甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
通用型EBV（EPSTEIN-BARR）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒
石蠟切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
乳制品尿素比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞免疫熒光顯微鏡間接檢測試劑盒（含熒光二抗）
組織ROCK-II激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
BrdU標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒
中心體蛋白63抗體
酰胺水解酶抗體
溶質(zhì)載體家族22成員13抗體
MCEE蛋白抗體
細(xì)胞周期后期促進蛋白亞基10抗體
白蛋白（內(nèi)參）單克隆抗體
磷酸化CD156b抗體
CD23/FcεRII抗體
豬肝星狀細(xì)胞（永生化）血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體
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