型 號
產(chǎn)品時間2024-02-22
所屬分類小鼠原代細(xì)胞
報價2600
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞 | 貨號 | EY-XY3617 |
英文名稱 | Aortic Adventitial Fibroblasts Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞分離自主動脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時,成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu) |
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
胸苷激酶2抗體
動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性定量檢測試劑盒
土壤DNA分離試劑盒
埃蒙氏(EMMONS)真菌培養(yǎng)基
石蠟切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
通用型豬流感(SI)基因檢測試劑盒
乙酰酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物(MDA)活性TBARS比色法定量檢測試劑盒
冰凍切片乳糖酶活性染色試劑盒
大量微藻菌基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/酚)
細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)基比色法定量檢測試劑盒
酵母β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒
細(xì)胞PI3K激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
溶酶體膜完整性(integrity)熒光檢測試劑盒
整合素β4抗體
干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白2抗體
熱休克因子結(jié)合蛋白1抗體
LANCL3蛋白抗體
細(xì)胞色素P450 2B6抗體
β細(xì)胞素抗體
類腫瘤性抗原MA5抗體
小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞Bcl2樣凋亡蛋白9抗體
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