收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產品名稱 | 兔冠狀動脈內皮細胞 | 貨號 | EY-XY3805 |
英文名稱 | Coronary Artery Endothelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:兔冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
內皮細胞層是血液和其它組織的天然屏障。內皮細胞功能病變是造成動脈粥樣硬化的主要原因。內皮細胞同時會合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統的增強和抑制物,以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時也會分泌控制細胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。人內皮細胞會分泌t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應TNF-α,繼而分泌細胞因子GM-CSF,表達ICAM-1表面抗體,產生大量的一氧化氮和endothelin。經皮冠狀動脈腔內成形術(PTCA)造成的內皮細胞受損和功能破壞可能是導致術后動脈再狹窄的重要原因。 |
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
鋅指蛋白786抗體
細胞過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性
[α32P]dCTP聚合酶標記法酶切產物處理試劑盒
通用型HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒定性檢測試劑盒
載玻片細胞TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
肉類氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量檢測試劑盒
冰凍切片半-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測試劑盒
細胞ROS激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
石蠟切片細胞細胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片蘇木素染色試劑盒
活性比色法定量檢測試劑盒
石蠟切片銅熒光(CSI)染色試劑盒
水中隱孢子蟲(Cryptosporidium)基因定性檢測試劑盒
石蠟切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
細胞基質金屬(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒
動物腦組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒
早期B淋巴細胞因子2抗體
鈣粘蛋白LKC抗體
驅動蛋白家族成員22抗體
JOSD1蛋白抗體
細胞骨架相關蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體
ZC3H15蛋白抗體
跨膜蛋白93抗體
兔冠狀動脈內皮細胞APC標記小鼠CD11c單克隆抗體
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