769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 5-lipoxygenase activating protein： 5脂氧合酶激活蛋白抗體 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6

SW1990細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7 小鼠白介素21(IL21)ELISA試劑盒 5T4： 滋養(yǎng)層細(xì)胞糖蛋白5T4抗體 COQ7 Others Human 人 COQ7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNAHHGMC NA 小鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒 8-OHdG： 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷抗體 EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml 小鼠白介素20(IL20)ELISA試劑盒 alpha-Synuclein (NT)： 核突觸蛋白-α抗體 膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

IBRS-2(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒 ANUP： 抗蛋白ANUP抗體 人神經(jīng)細(xì)胞(HN) (10×106 )

A3人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 rHIL-1Ra/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記-1受體拮抗劑 0.1ml

LLGL2： 相似抑制基因HUGL抗體 CD2 Others Human 人 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺成纖維細(xì)胞HPF 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 KLH/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記血藍(lán)蛋白 0.1ml

LAMTOR1： LAMTOR1蛋白抗體 小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1

B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(AIL-R1)ELISA試劑盒 OVA (Ovalbumin)/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白 0.1ml

769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞Hurt-78細(xì)胞，人T細(xì)胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-swiss albino細(xì)胞 人肺泡上皮細(xì)胞cDNAHPAEpiC cDNA 人可溶性轉(zhuǎn)受體(sTfR)ELISA 試劑盒 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗原(N端) 0.5mg

GNPTAB： 溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體 PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA 試劑盒 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗原 0.5mg

GSK3 Alpha + Beta： 糖原合酶激酶3α+β抗體 人胚腎細(xì)胞;2V6.11

COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA 試劑盒 MMP9 基質(zhì)金屬蛋白酶9 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。